Anti-PADI4 antibody suppresses breast cancer by repressing the citrullinated fibronectin in the tumo

文献信息

（原文下载：抗 PADI4 抗体通过抑制肿瘤微环境中的瓜氨酸纤连蛋白来抑制乳腺癌）

近日，青岛大学附属医院医学研究中心常晓天教授团队的研究成果"Anti-PADI4 antibody suppresses breast cancer by repressing the citrullinated fibronectin in the tumor microenvironment(抗 PADI4 抗体通过抑制肿瘤微环境中的瓜氨酸纤连蛋白来抑制乳腺癌)",在ELSEVIER(生物医学与药物治疗期刊)上发表，麦德盈华科技有限公司的亚毫米小动物PET（型号:MadicLab PSA094）在论文中提供了重要的小动物肿瘤成像和定量分析。

一、本文摘要

PADI4是一种将精氨酸残基催化为瓜氨酸残基的酶，在恶性肿瘤中高度表达。本研究制备了一种抗人PADI4单克隆抗体，并研究了该抗体对乳腺肿瘤的治疗作用及其作用机制。

二、实验方法

用PADI4抗体治疗后，通过PET-CT（用异氟醚麻醉小鼠，将显像剂 18 F-氟脱氧葡萄糖（18 F-FDG）以每只小鼠 12 MBq 的剂量注射到小鼠的尾静脉中。在PET-CT设备（MadicLab PSA094，Madic Technology，China）上进行PET-CT投影扫描（60 KV，10 mA）。通过三维子集期望最大化（3D-OSEM）重建图像，并使用Pmod软件对图像进行PET-CT融合。CT 图像用于辅助 PET 图像识别肿瘤特征。标准化摄取值通过下式计算肿瘤组织的(SUV)：SUV =感兴趣区域活性浓度(MBq/ml)/注射活性浓度(MBq/ml)/体重(kg)。）、病理学检测、生化检测、常规血液检测、细胞因子检测和代谢检测检测荷瘤小鼠的变化。我们使用 PADI4重组蛋白催化纤连蛋白(Fn)，然后使用瓜氨酸化纤连蛋白 (Cit-Fn) 培养 MDA-MB-231 细胞。我们还用 PADI4 抗体处理了 Cit-Fn 培养的细胞。使用细胞增殖、凋亡、集落形成、迁移和乙醇酸ATP产生来检查培养的细胞。分别使用蛋白质印迹和ELISA测量肿瘤组织和外周血中的瓜氨酸化。

三、实验结果

PADI4抗体处理后，肿瘤生长明显受到抑制，肿瘤组织中凋亡细胞的数量增加。治疗后外周血和肿瘤组织中的瓜氨酸水平降低，肿瘤中EMT相关基因的表达也降低，荷瘤小鼠的自发运动增加。抗体处理后，IL-10、IL-12p70、IL-23、ALT和AST的血清浓度显着降低。用 Cit-Fn 处理的 MDA-MB-231 细胞显示出增加的细胞增殖、细胞迁移、集落形成和糖酵解 ATP 产生并减少细胞凋亡。PADI4抗体处理后MDA-MB-231细胞的生长和迁移减少，并且PADI4抗体在体外抑制纤连蛋白的瓜氨酸化。

荷瘤小鼠的肿瘤生长。A. 接受或不接受PADI4抗体治疗的荷瘤小鼠。B. 从带有或不带有 PADI4 抗体处理的荷瘤小鼠中收集肿瘤组织。C. 荷瘤小鼠的肿瘤体积生长曲线。D. 荷瘤小鼠的肿瘤重量。E. 荷瘤小鼠的 PET-CT 扫描。F. PET-CT 扫描的肿瘤体积。G.肿瘤组织的SUV值。H. 荷瘤小鼠肿瘤组织的苏木精-伊红染色 I. 荷瘤小鼠肿瘤组织的TUNEL染色 (200X)。

四、实验结论

PADI4抗体通过抑制纤连蛋白的瓜氨酸化改变肿瘤组织微环境，对乳腺肿瘤具有治疗作用。PADI4抗体是一种潜在的肿瘤治疗手段。

五、实验设备

MadicLab PET-CT（型号：PSA094）(麦德盈华)