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(原文下载:抗 PADI4 抗体通过抑制肿瘤微环境中的瓜氨酸纤连蛋白来抑制乳腺癌)
近日,青岛大学附属医院医学研究中心常晓天教授团队的研究成果"Anti-PADI4 antibody suppresses breast cancer by repressing the citrullinated fibronectin in the tumor microenvironment(抗 PADI4 抗体通过抑制肿瘤微环境中的瓜氨酸纤连蛋白来抑制乳腺癌)",在ELSEVIER(生物医学与药物治疗期刊)上发表,麦德盈华科技有限公司的亚毫米小动物PET(型号:MadicLab PSA094)在论文中提供了重要的小动物肿瘤成像和定量分析。
一、本文摘要
PADI4是一种将精氨酸残基催化为瓜氨酸残基的酶,在恶性肿瘤中高度表达。本研究制备了一种抗人PADI4单克隆抗体,并研究了该抗体对乳腺肿瘤的治疗作用及其作用机制。
二、实验方法
用PADI4抗体治疗后,通过PET-CT(用异氟醚麻醉小鼠,将显像剂 18 F-氟脱氧葡萄糖(18 F-FDG)以每只小鼠 12 MBq 的剂量注射到小鼠的尾静脉中。在PET-CT设备(MadicLab PSA094,Madic Technology,China)上进行PET-CT投影扫描(60 KV,10 mA)。通过三维子集期望最大化(3D-OSEM)重建图像,并使用Pmod软件对图像进行PET-CT融合。CT 图像用于辅助 PET 图像识别肿瘤特征。标准化摄取值通过下式计算肿瘤组织的(SUV):SUV =感兴趣区域活性浓度(MBq/ml)/注射活性浓度(MBq/ml)/体重(kg)。)、病理学检测、生化检测、常规血液检测、细胞因子检测和代谢检测检测荷瘤小鼠的变化。我们使用 PADI4重组蛋白催化纤连蛋白(Fn),然后使用瓜氨酸化纤连蛋白 (Cit-Fn) 培养 MDA-MB-231 细胞。我们还用 PADI4 抗体处理了 Cit-Fn 培养的细胞。使用细胞增殖、凋亡、集落形成、迁移和乙醇酸ATP产生来检查培养的细胞。分别使用蛋白质印迹和ELISA测量肿瘤组织和外周血中的瓜氨酸化。
三、实验结果
PADI4抗体处理后,肿瘤生长明显受到抑制,肿瘤组织中凋亡细胞的数量增加。治疗后外周血和肿瘤组织中的瓜氨酸水平降低,肿瘤中EMT相关基因的表达也降低,荷瘤小鼠的自发运动增加。抗体处理后,IL-10、IL-12p70、IL-23、ALT和AST的血清浓度显着降低。用 Cit-Fn 处理的 MDA-MB-231 细胞显示出增加的细胞增殖、细胞迁移、集落形成和糖酵解 ATP 产生并减少细胞凋亡。PADI4抗体处理后MDA-MB-231细胞的生长和迁移减少,并且PADI4抗体在体外抑制纤连蛋白的瓜氨酸化。
荷瘤小鼠的肿瘤生长。A. 接受或不接受PADI4抗体治疗的荷瘤小鼠。B. 从带有或不带有 PADI4 抗体处理的荷瘤小鼠中收集肿瘤组织。C. 荷瘤小鼠的肿瘤体积生长曲线。D. 荷瘤小鼠的肿瘤重量。E. 荷瘤小鼠的 PET-CT 扫描。F. PET-CT 扫描的肿瘤体积。G.肿瘤组织的SUV值。H. 荷瘤小鼠肿瘤组织的苏木精-伊红染色 I. 荷瘤小鼠肿瘤组织的TUNEL染色 (200X)。
四、实验结论
PADI4抗体通过抑制纤连蛋白的瓜氨酸化改变肿瘤组织微环境,对乳腺肿瘤具有治疗作用。PADI4抗体是一种潜在的肿瘤治疗手段。
五、实验设备
MadicLab PET-CT(型号:PSA094)(麦德盈华)